Bagaimana cara mengatur pemisahan atau resolusi?

Untuk dapat mengatur pemisahan atau resolusi kita harus mengetahui terlebih dahulu bahwa nilai R_s bervariasi  dengan parameter eksperimental seperti k (kapasitas) dan n (effisiensi).

Langkah selanjutnya kita harus menurunkan suatu persamaan untuk kedua puncak yang berurutan (yaitu puncak-puncak yang mengalami tumpang tindih).

Jika diketahui bahwa t₁ = t₀(1+k₁) dan t₂= t₀(1+k₂), dimana k₁ dan k₂ adalah nilai kapasitas untuk puncak 1 dan 2. Jika t₁ ≈ t₂, maka dari persamaan 

kita mendapatkan t_w1≈t_w2 (efisiensi diasumsikan konstan untuk puncak 1 dan 2).  Jika dimasukkan ke dalam persamaan 

maka dihasilkan persamaan

Dengan cara yang sama, persamaan 

untuk puncak 1 menjadi t_w1=4_t1/√n=4t₀(1+k₁)/√n. Jika persamaan ini dimasukkan ke dalam persamaan  

maka dihasilkan persamaan 

Apabila kita mendefinisikan faktor pemisahan (selektivitas) α =k₂/k₁untuk puncak 1 dan 2, dan menganggap k₁≈k₂ = nilai rata-rata k’ untuk kedua puncak ersebut, maka persamaan menjadi

Persamaan di atas merupakan suatu hubungan yang fundamental dalam LC yang membantu kita untuk mengatur resolusi dengan memvariasi α, n atau k’. Ketiga parameter (i, ii, iii) dalam persamaan di atas secara kasar independen sehingga kita dapat mengoptimasi salah satu parameter terlebih dahulu, diikuti parameter yang lain. Selektivitas pemisahan seperti yang ditunjukan oleh parameter i dari persamaan di atas bervariasi dengan berubahnya komposisi fase gerak dan atau fase diam. Efisiensi pemisahan seperti yang ditunjukkan oleh parameter ii bervariasi dengan berubahnya panjang kolom L atau kecepatan fase gerak u (atau dengan merubah pengepakan kolom). Parameter iii, yang melibatkan faktor kapasitas k’, bervariasi dengan perubahan kekuatan pelarut -kemampuan fase gerak untuk menghasilkan nilai k’ yang besar atau kecil- yang tergantung dari suatu senyawa yang akan dipisahkan.